Acclaim液相色譜柱的柱壓過高可能是微粒堵塞。柱床膨脹,不可逆吸附,細(xì)菌生長等造成的。也有可能是系統(tǒng)反壓問題,例如阻尼器堵塞,進(jìn)樣器堵塞,管路或連接口堵塞。在線過濾器不干凈,壓力傳感器不準(zhǔn)確等。Acclaim液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,
Acclaim液相色譜柱被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
Acclaim液相色譜柱使用的3個注意事項:
1.Acclaim液相色譜柱的安裝
色譜柱在使用過程中避免強(qiáng)烈的碰撞和震動。各個廠家生產(chǎn)的色譜柱在接口尺寸上有差異,如果柱頭類型和不銹鋼毛細(xì)管接頭兩者類型不匹配,將會產(chǎn)生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長,不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。
2.Acclaim液相色譜柱的平衡
色譜柱平衡指的是用完整的分析程序,運(yùn)行幾遍測試,等觀察到峰形、保留時間和峰面積穩(wěn)定為止,平衡即完成。另外,在使用緩沖鹽時,應(yīng)該先使用水過渡后,再將緩沖鹽引入色譜柱,以防止鹽析發(fā)生,從而損壞色譜柱。
3.Acclaim液相色譜柱的保存
較好遵守色譜柱說明書中的保持方式。在實際應(yīng)用中為了方便也可以如下使用:短期保持用所用的流動相保存為佳,這樣做可以減少下次使用的平衡時間。一般情況下,建議長期用80%甲醇或乙腈來保存反相柱。純有機(jī)相保持有較大限度減少鍵合相水解的作用,但純甲醇(乙腈)又會將已水解而暫時吸附在柱內(nèi)的鍵合相洗脫出去,使固定相流失進(jìn)程加快,縮短壽命;另外,純有機(jī)相保存時,溶劑易揮發(fā),導(dǎo)致柱床變干,也會容易損壞色譜柱。正相柱一般應(yīng)保持在所用流動相中。